腺苷蛋氨酸基因工程菌的构建及酶的表征【知网论文查重】

知网论文查重12月11日检测样例

腺苷蛋氨酸的生产方法

随着对SAM处方制剂的开发和对SAM其他方面用途的研究，对SAM的需求量也日益增加，因此有关SAM的制备方法成为研究热点。目前生产SAM主要有化学合成法、微生物发酵法和酶促转化法。

（1）化学合成法

目前，化学合成法制备SAM主要有以下几条条途径：

①利用5′-甲硫腺苷和DL-2-氨基-4-溴丁基酸化学合成消旋的SAM，合成的SAM有50%具有生物活性；

②通过S-腺苷同型半胱氨酸和甲基供体CH₃I或(CH₃)₃SI催化合成，反应底物SAH价格昂贵，而且产物中含有20%～30%没有生物活性的(R，S)-SAM异构体；

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③以价格相对较低的腺苷为底物与亚硫酰氯一起进行反应以获得5-(氯甲基)腺苷盐酸盐；以L-甲硫氨酸为底物在-30～ -40℃的条件下生成L-同型半胱氨酸；以5-(氯甲基)腺苷盐酸盐和L-同型半胱氨酸为底物并在70～80℃的条件下进行缩合反应得到S-腺苷同型半胱氨酸；以三甲基氧鎓四氟硼酸盐为甲基供体对SAH进行甲基化得到终产物SAM。尽管该方法原料价格低廉，但是反应过程复杂、反应温度极端、反应周期长，并且反应产物仅有60%～65%具有生物活性。

使用化学法生产合成的SAM产率较低，反应条件较为苛刻，成本较高且对环境污染较大因此很少使用。

（2）微生物发酵法

微生物发酵法是20世纪60年代至今工业化生产SAM的主要途径。一些微生物尤其是酵母属的菌株，在含有L-甲硫氨酸的培养基中生长时，可以在细胞内积累较高浓度的SAM。通过这些微生物的大规模发酵及提取精制，可获得有生物活性的SAM。

SAM的微生生物发酵主要利用天然菌株和重组菌进行生产，而其中野生菌发酵生产SAM产量较低。为解决这一问题，通过基因工程技术以及代谢调控来有效提高SAM的产量得到了广泛应用。

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